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犬隻脂肪來源幹細胞於軟骨分化之特定微型核糖核酸表現

為了解決AMI PUMA的問題，作者簡采甄 這樣論述：

犬隻骨關節炎是常見造成犬隻慢行疼痛與跛行的原因，其特徵包含了關節軟骨的破壞、骨贅生成以及軟骨下骨骨化等。在患有骨關節炎的犬隻，通常被認為其軟骨的恆定受到改變以及細胞外基質的生合成與降解的平衡被破壞。在部分研究中認為在患有骨關節炎的病患使用幹細胞治療可能可以改善其關節的病理狀態，甚至可以新生軟骨。因此在犬隻的骨關節炎病患，也有報告使用犬隻脂肪來源幹細胞進行關節內注射，並顯示相較於傳統止痛治療，幹細胞擁有較好且較長的緩解疼痛效果。微型核糖核酸為一群長度約18-22個核苷酸的非編碼單股核糖核酸，可藉由與目標傳訊核糖核酸的3’非編碼區 (3’UTR)結合，並調節其轉譯後基因沈默。近期的研究中證明在人

類與老鼠的間葉幹細胞中，微型核糖核酸可以藉由標的SOX基因 (如SOX9及SOX5)進而調控軟骨分化作用。不過目前在犬隻間葉幹細胞中並沒有相關的研究，因此在此研究中，希望找出在犬隻脂肪來源幹細胞進行軟骨分化的過程中，具有調節作用的微型核糖核酸。在第一部分，我們在犬隻脂肪來源幹細胞進行軟骨分化的過程中，每兩天收集一次軟骨球樣本，並去檢測其軟骨細胞相關的標記基因表現。發現標記基因開始表現的時間約在分化後的3-7天，而表現的高峰約在分化後11-15天。而後使用H&E、alcian blue以及toluidine blue進行軟骨球的染色並且評估其軟骨球的組織結構。雖然在組織結構上並沒有出現軟骨細胞的

典型結構，但在陽性分化組別與陰性控制組別的軟骨球在形態上具有明顯的差異。在確認犬隻脂肪來源幹細胞的軟骨分化後，我們在第0天 (分化前)、第7天與第15天，使用即時聚合酶鏈式反應分別去檢測特定選擇微型核糖核酸 (miR-140、miR-145與miR-23b)的表現，但在組別間的表現模式有滿大的差異。因此仍需要後續的實驗再去確認在不同的分化條件下其微型核糖核酸的表現。但此結果也顯示了在犬隻脂肪來源幹細胞的軟骨分化中，微型核糖核酸扮演了重要的角色，並且之後可與犬隻脂肪來源幹細胞並用於骨關節炎犬隻的治療的可能性，提升幹細胞治療的效果。