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應用 API-ZYM 多酶套組分析雲芝種菌特性及其相關產品多醣體樣品製備與分析探討

為了解決舒暢益生菌評價的問題，作者林煜庭 這樣論述：

雲芝是一種小型多孔真菌，是遍布全世界森林生態中分解死掉或枯萎樹木的重要環節。雲芝不僅作為中藥使用，其發酵菌絲體所產生之多醣體複合物-醣肽也已被開發為「藥品」。本研究主要目的為應用 API-ZYM 多酶套組分析本土發現之雲芝品系 LH-1種菌特性，探討液態培養上清液、菌絲體及平板培養菌落不同代數間酶譜差異之比較、HPLC 指紋圖譜變化、分析野外採集雲芝菌種多酶套組酶譜、評估不同樣品製備處理方式(透析時間、酶處理時間及解凍條件)與不同計算基礎換算對雲芝多醣體含量之影響。此外，分析雲芝市售產品多醣體之分子量與單醣組成之差異。 結果顯示雲芝種菌不同代數培養上清液、菌絲體與菌落應用API-Z

YM 多酶套組分析之酶譜活性指數及強弱表現，菌落於酶譜中所顯示之酶種類較培養上清液及菌絲體多樣，且活性指數亦較強，較適於判斷培養菌株代數差異及菌種種菌品管之依據。不同代數培養上清液及菌絲體萃取物所產生之指紋圖譜彼此間並無顯著差異，譜型皆呈現 5 個主要波峰。在譜型判別上，雲芝菌絲體萃取液之分散性較發酵培養液主波峰之集中性更易判斷菌種種菌品質之穩定性。利用 API-ZYM 酶譜中特定酶種類之存在或不存在可做為野外採集雲芝品系間區辨之參考。將萃取液分別以(1)透析法(2)水萃法(3)酒精澱析法等三種方法製備分析樣品，顯示三種樣品製備方法中以「水萃法」所得數據之多醣體含量皆為最高，而以「透析法」與「

酒精澱析法」分析不同產品樣品中，所得數據各有高低，以「透析法」分析之多醣體含量較「酒精澱析法」為低。樣品製備處理之透析及酶處理時間與解凍條件，可影響雲芝多醣體分析之結果。材料來源相同但後續雲芝之子實體與菌絲體或發酵液經不同分離及純化單醣含量之比例以及分子量範圍都會不同。 綜合上述結果，API-ZYM 多酶套組可應用於分析雲芝 LH-1品系菌種特性及做為不同世代種菌品管之依據，雲芝市售相關產品以酚硫酸法分析樣品中多醣體含量時，樣品之製備方式顯著影響其分析之結果。